BIS-TRIS

基本情報：

• CAS No.: 6976-37-0
• 有用なpH範囲: 5.8 – 7.2

BIS-TRISの適用:

• AAV8 ベクターを用いた血友病 B 遺伝子治療の純度とゲノムの完全性の分析、および生物学的有効性の決定において、ゲル電気泳動の分析ステップで分離コロイドとして使用されます。 [2]

HEPES

基本情報：

• CAS No.: 15471-17-7
• 有用なpH範囲: 6.8 – 8.2

HEPES の適用:

• HEK293T 細胞の pH 値を中和するための酸性溶解バッファーのバッファーとして、AAV ベクターの製造と精製に使用されます。 [1]
• AAVの生産のために、細胞培養培地のpH値を維持するためにHEK293Tの細胞培養用の緩衝液として使用されました。 実験結果によると、ウイルス プラスミドのリリースとウイルスの生産が大幅に増加します。 [1]

特別な細胞株の細胞培養培地を準備する必要がある場合は、
細胞毒性試験に合格したHEPES（細胞培養グレード）もご用意しております。

参考文献:Why use HEPES?

TRIS

基本情報:

• CAS No.: 77-86-1
• 有用なpH範囲: 7.2 – 9.0

TRISの適用:

• レンチウイルスベクターの精製プロセスでは、PBS バッファーは低温では緩衝能がなく、ベンゾナーゼステップと互換性がないため、TRIS はここでの洗剤として最適です。 さらに、TRIS は、ウイルスが AEXc マトリックスに結合する際の pH 制限を回避することもできます [3]。
• ウイルス粒子の精製の過程で、ウイルス粒子産生の過程で採取された細胞を溶解バッファー（50 mM Tris、150 mM NaCl、2 mM MgCl2、pH 7.5）に再懸濁しました。 その後、3回の凍結融解サイクルでウイルス粒子が細胞から放出されました[5]。

TRIS-HCL

基本情報：

• CAS No.: 1185-53-1
• 有用なpH範囲: 7.2 – 9.0

TRIS-HCL の適用:

• AAV8ベクターを用いた血友病B遺伝子治療の純度とゲノムの完全性の分析、および生物学的有効性の決定において、ゲル電気泳動分析ステップ後のインキュベーション溶液として使用されます。 [2]

参考文献:How to prepare adeno-associated viruses (AAV) vectors?

CHAPS

基本情報：

• CAS No.: 75621-03-3

CHAPS の適用:

• プロテオミクスの場合: 哺乳類の細胞および組織分析のための TMT サンプル調製では、CHAPS 溶解バッファーを使用することで、タンパク質消化中の偶発的なタンパク質分解を回避し、タンパク質抽出効率を向上させることができます [4]。
• CHAPS (0.5% w/v) を添加する前に、ベンゾナーゼヌクレアーゼと 37℃ でインキュベートすることにより、残りの DNA 混入を分解しました。 遠心分離（３０００ｇ、１０分）により粗溶解物を細胞片から除去した。 [5]
• CHAPS は、内膜のタンパク質と受容体を溶解するために使用され、タンパク質の活性を維持する能力があります[6]。
• CHAPSの存在下でタンパク質をヨウ素化することができます。 [6]

参考文献: What is gene therapy?

参考文献: The four kinds of viral vectors which most use in gene therapy

参考文献:Why use CHAPS?

Reference:

^[1] Production of adeno-associated virus vectors for in vitro and in vivo applications: https://www.nature.com/articles/s41598-019-49624-w

^[2] Development of an In Vitro Biopotency Assay for an AAV8 Hemophilia B Gene Therapy Vector Suitable for Clinical Product Release: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2329050120300437

^[3] Downstream Processing of Lentiviral Vectors: Releasing Bottlenecks https://www.liebertpub.com/doi/pdf/10.1089/hgtb.2012.059

^[4] TMT Sample Preparation for Proteomics Facility Submission and Subsequent Data Analysis: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7442215/

^[5] ijms-20-05702.pdf

^[6] Method for the production and purification of adenoviral vectors: https://patents.google.com/patent/US7732129B1/en