トリスは、生物学的および生化学的研究でよく使用される双性イオン緩衝液です。 でも… Trisは実際に何に適していますか？ 科学者が Tris の特性とさまざまなバイオテクノロジー アプリケーション (電気泳動、クロマトグラフィーなど) への適合性をよりよく理解できるように、有名な学術情報源から信頼できる情報を収集しました。 Tris バッファーの使用方法を確認してください。

TRIS基本情報:

• CAS番号: 77-86-1
• 分子量: 121.14 g/mol
• 分子式: C4H11NO3
• 有用なph範囲: 7.2 - 9.0
• pKa (25℃): 8.06

参考文献:Solubility of Tris buffer in different solvents

TRIS は何に推奨されますか?

1. ゲル電気泳動（TAEまたはTBE）用の緩衝液で一般的に使用されます
2. Laemmli バッファーの調製に一般的に使用されます (SDS-PAGE でのタンパク質サンプルの変性とローディングに使用)
3. 陰イオン交換クロマトグラフィー用¹
4. 細菌エンドトキシンの評価用²
5. イオン移動度が低いため、キャピラリー電気クロマトグラフィー (CEC) 用³

参考文献:The 10 best biological buffers for chromatography

研究に TRIS を選択する前に考慮すべきことは何ですか?

• pH 7.54 未満ではあまり効率的ではありません⁴
• 潜在的に反応性の第一級アミンがあり、しばしば阻害剤として作用します⁴
• 膜を透過する傾向があるため、ほとんどの細胞培養作業には適していません⁵
• 多くの哺乳類細胞にとって有毒です⁶
• It is not suitable for use with the Bicinchoninic acid (BCA) assay
• ビシンコニン酸 (BCA) アッセイでの使用には適していません。
• タンパク質アッセイのブラッドフォード色素結合法を妨害する可能性があります
• カルシウムやその他の必須金属をキレート化することが知られています
• Tris を含む溶液の pH は温度に大きく依存するため、使用する温度で Tris バッファーを調製することが重要です ⁷
• 重炭酸塩/CO2 バッファーシステムと相互作用する可能性があります⁸

TRIS に関する役立つヒント:

• 有機溶剤への溶解度が高い
• 数種類の酵素と反応して阻害する
• 一般的な RNase 阻害剤である DEPC を不活化します。

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References:

¹ Huisman, T. H., & Dozy, A. M. (1965) Studies on the heterogeneity of hemoglobin: IX. The use of tris (hydroxymethyl) aminomethane—HCl buffers in the anion-exchange chromatography of hemoglobins. Journal of Chromatography A, 19, 160-169. Available at https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0021967301994348

² Fujita, Y., Tokunaga, T. and Kataoka H. (2011) Anal. Biochem., 409, 46–53. Available at https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20951111

³ Altria, K. D., Smith, N. W. and Turnbull, C. H. (1998) J. Chromatogr. B: Biomed. Sci. Appl., , 717, 341–353.

⁴ Ferreira C. M., Pinto I.S., Soares, E.V., & Soares H.M. (2015) (Un)suitability of the use of pH buffers in biological, biochemical and environmental studies and their interaction with metal ions – a review, Royal Society of Chemistry 30989-31003. Available at https://repositorium.sdum.uminho.pt/bitstream/1822/38712/1/document_19948_1.pdf

⁵ Renganathan M., and Bose S. (1990) Photosynth. Res., 23, 95–99. Available at https://link.springer.com/article/10.1007/BF00030068

⁶ Russell, D. W. and Sambrook, J. (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York, 3rd edn. Available at https://cshlpress.com/default.tpl?action=full&src=pdf&--eqskudatarq=934

⁷ El-Harakany, A. A., Halim, F. A., & Barakat, A. O. (1984) Dissociation constants and related thermodynamic quantities of the protonated acid form of tris-(hydroxymethyl)-aminomethane in mixtures of 2-methoxyethanol and water at different temperatures. Journal of Electroanalytical Chemistry and Interfacial Electrochemistry, 162(1), 285-305. Available at https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0022072884801710

⁸ Mauger J. W. (2017) Physicochemical Properties of Buffers Used in Simulated Biological Fluids with Potential Application for In Vitro Dissolution Testing: A Mini-review, Dissolution Technologies. August 2017. Available at https://www.dissolutiontech.com/issues/201708/DT201708_A03.pdf