あなたの知らない MOPS バッファーの 8 つの用途

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MOPS は、生物学および生化学研究でよく使用される両性イオン性生物学的緩衝液です。 MOPS バッファーが研究されたいくつかの学術論文をレビューした後、このバッファーを使用する際に必要ないくつかの推奨事項と懸念事項を共有したいと思います。 これらのヒントがお役に立てば幸いです。
 

MOPSの基本情報:

  • CAS 番号: 1132-61-2
  • 分子量: 209.3\
  • 化学式: C7H15NO4S
  • 有用なph範囲: 6.5 - 7.9
  • pKa（25℃）：7.0～7.4
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MOPSは何に推奨されますか?

  1. RNAの変性ゲル電気泳動用1
  2. クロマトグラフィーにおけるタンパク質精製用
  3. UV/VIS 分光測光中の吸収を測定し、サイクリック ボルタン
  4. トリーを使用して酸化還元特性を研究する2
  5. ニトロゲナーゼの電子伝達機構3
  6. 電気泳動による核酸とタンパク質の分離4
  7. 酵母、細菌、哺乳類細胞の細胞培養培地を含む培地 pH 5 の制御。
  8. 炭酵母エキス培地の緩衝成分として使用されています6
  9. ウシ血清アルブミンのペプチド骨格と相互作用し、タンパク質の最終的な安定化につながります7

 

研究に MOPS を選択する前に、どのような点に注意する必要がありますか?

  • 哺乳動物の細胞培養に使用する場合、MOPS 濃度は 20mM 以下である必要があります。
  • ほとんどの研究では、Mops と金属の間に錯体形成はほとんど見られませんでしたが、一部の研究では、金属錯体の形成により干渉が発生する可能性があることが判明しました8
  • 脂質相互作用を変更することができます9
  • MOPS はラットの内皮表面層の厚さとバリア特性に影響を与える可能性があります10
  • DNA と相互作用して複合体を形成します11
  • in vitro で生産されたウシ胚の mRNA 発現にわずかに影響を与える可能性があります 12
  • モップはローリータンパク質の測定を妨害します
  • H2O2 によって酸化される可能性がありますが、バッファーの酸化は遅いため、生物学的システムへの重大な影響は起こらないと予想されます 13
  • MOPS はグルコースの存在下でオートクレーブ処理すると部分的に分解されます。

 

MOPS に関する役立つヒント:

  • ブラッドフォードまたはビシンコニン酸アッセイを妨げません14

 

詳細情報:Why use MOPS?

 

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References:

1 Russell, D. W. and Sambrook, J. (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York, 3rd edn. Available at https://www.cshlpress.com/pdf/sample/2013/MC4/MC4FM.pdf

2 Collins, C. A., Fry, F. H., Holme, A. L., Yiakouvaki, A., Al-Qenaei, A., Pourzand, C., & Jacob, C. (2005) Towards multifunctional antioxidants: synthesis, electrochemistry, in vitro and cell culture evaluation of compounds with ligand/catalytic properties. Organic & Biomolecular Chemistry, 3(8), 1541-1546. Available at https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2005/ob/b503282m#!divAbstract

3 Mayweather, D., Danyal, K., Dean, D. R., Seefeldt, L. C. and Hoffman, B. M. (2012) Biochemistry, 51, 8391–8398. Available at https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23050654

4 Garfin, D. E. (1990) in Methods in Enzymology, Guide to protein purification, ed. P. M. Deutsche, Academic Press, San Diego, pp. 425–441. Available at https://www.worldcat.org/title/guide-to-protein-purification/oclc/463300660

5 de Klerk, G. J., Hanecakova J. and Jasik, J. (2008) Plant Cell, Tissue Organ Cult., 95, 285–292. Available at https://www.researchgate.net/publication/226844998_Effect_of_medium-pH_and_MES_on_adventitious_root_formation_from_stem_disks_of_apple

6 Edelstein, P. H. and Edelstein, M. A. C. (1993) J. Clin. Microbiol., 31, 3329–3330. Available at https://jcm.asm.org/content/jcm/31/12/3329.full.pdf

7 Taha, M., Gupta, B. S., Khoiroh, I., Lee, M.J. (2011) Interactions of Biological Buffers: The Ubiquitous “Smart” Polymer PNIPAM and the Biological Buffers, MES, MOPS and MOPSO. Macromolecules, 44, 8575-8589. Available at https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ma201790c

8 Taha, M., Gupta, B. S. and Lee, M. J. (2011) Chem. Eng. Data, 56, 3541–3551. Available https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/je200345a

9 Koerner, M. M., Palacio, L. A., Wright, J. W., Schweitzer, K. S., Ray, B. D. and Petrache, H. I. (2011) Biophys. J.,101, 362–369. Available https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21767488

10 van Haaren, P. M. A., VanBavel, E., Vink, H. and Spaan, J. A. E. (2005) J. Physiol.: Heart Circ. Physiol., 289, H2503–H2507. Available at https://pdfs.semanticscholar.org/6bb2/3e5704e2e54e798ceda40630c797089909ad.pdf

11 Stellwagen, N. C., Bossi, A., Gelfi, C. and Righetti, P. G. (2000) Anal. Biochem., 287, 167-175. Available at https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11078596

12 Palasz, A. T., Breña, P. B., De la Fuente, J. and Gutiérrez- Adán, A. (2008) Theriogenology, 70, 1461–1470. Available https://europepmc.org/abstract/MED/18675448

13 Zhao, G. and Chasteen, N. D. (2006) Anal. Biochem., 349, 262–267. Available at https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16289439

14 Grady, J. K., Chasteen, N. D., & Harris, D. C. (1988) Radicals from “Good's” buffers. Analytical Biochemistry, 173(1), 111-115. Available at https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2847586

発売日：2018.10.19

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