HEPES VS PBS (phosphate buffered saline)

生物緩衝液可穩定水溶液的 pH 值,因此被廣泛使用於生物實驗中。而過去常用的傳統緩衝液 ,如碳酸鹽緩衝液和磷酸鹽緩衝液,通常於許多生物實驗中不適用。這些試劑在 pH 7.5 以上不能有效的緩衝, 並會產生一些干擾反應。因此Norman Good 博士等人於1966 年提出了一系列可解決傳統緩衝液限 制的兩性離子緩衝液,這些緩衝液之pKa 值等於或接近生理 pH 值,對細胞無毒,且不會通過細胞膜 吸收。在此為您整理出較常用的PBS(Phosphate buffered saline)與HEPES使用上的優缺點。

 
HEPES
PBS
有效的pH範圍
6.8-8.2
5.8-8.0
生物毒性
不具生物毒性
不具生物毒性
滲透壓
使用 0.1 M HEPES 顯著提高了培養基的滲透壓。
具備等滲透壓的特性,可防止細胞破裂。
細胞活力
HEPES 緩衝系統中可以看到更高的最大細胞密度和活力。
PBS 稀釋的細胞培養樣品可能會無意中降低細胞活力。
與金屬離子的關係
可以忽略不計的金屬離子產生絡合物或沉澱。
與部分金屬離子結合會產生絡合物或沉澱。
與酶促反應的關係
適合用於酶促反應
可能會抑制酶促反應
在冷凍情況下的變化
HEPES 溶液的冷凍不會導致 pH 變化。
PBS 溶液的冷凍導致顯著的 pH 變化。
高壓滅菌
不可高壓滅菌
可高壓滅菌
用於電子顯微鏡研究的前綴固定劑
Hepes 代替 PBS 避免了這種沉澱
由於磷酸鹽與二價陽離子有關。較高濃度的PBS會導致嚴重沉澱,從而阻止細胞有效過濾到過濾器上使用
用於層析法
於層析法中適用
於層析法中適用
HClO熒光檢測
不適用
適用
發佈日期:2021.06.14