HEPES VS PBS (phosphate buffered saline)

生物緩衝液可穩定水溶液的 pH 值,因此被廣泛使用於生物實驗中。而過去常用的傳統緩衝液 ,如碳酸鹽緩衝液和磷酸鹽緩衝液,通常於許多生物實驗中不適用。這些試劑在 pH 7.5 以上不能有效的緩衝, 並會產生一些干擾反應。因此Norman Good 博士等人於1966 年提出了一系列可解決傳統緩衝液限 制的兩性離子緩衝液,這些緩衝液之pKa 值等於或接近生理 pH 值,對細胞無毒,且不會通過細胞膜 吸收。在此為您整理出較常用的PBS(Phosphate buffered saline)與HEPES使用上的優缺點。
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HEPES
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PBS
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有效的pH範圍
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6.8-8.2
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5.8-8.0
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生物毒性
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不具生物毒性
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不具生物毒性
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滲透壓
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使用 0.1 M HEPES 顯著提高了培養基的滲透壓。
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具備等滲透壓的特性,可防止細胞破裂。
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細胞活力
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HEPES 緩衝系統中可以看到更高的最大細胞密度和活力。
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PBS 稀釋的細胞培養樣品可能會無意中降低細胞活力。
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與金屬離子的關係
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可以忽略不計的金屬離子產生絡合物或沉澱。
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與部分金屬離子結合會產生絡合物或沉澱。
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與酶促反應的關係
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適合用於酶促反應
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可能會抑制酶促反應
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在冷凍情況下的變化
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HEPES 溶液的冷凍不會導致 pH 變化。
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PBS 溶液的冷凍導致顯著的 pH 變化。
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高壓滅菌
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不可高壓滅菌
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可高壓滅菌
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用於電子顯微鏡研究的前綴固定劑
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Hepes 代替 PBS 避免了這種沉澱
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由於磷酸鹽與二價陽離子有關。較高濃度的PBS會導致嚴重沉澱,從而阻止細胞有效過濾到過濾器上使用
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用於層析法
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於層析法中適用
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於層析法中適用
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HClO熒光檢測
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不適用
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適用
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發佈日期:2021.06.14