Bis-Tris Buffer の使用 - スターティング ガイド

Bis-Tris は、最も一般的な両性イオンの生物学的緩衝液の 1 つであり、生物学的および生化学的研究でよく使用されます。 Bis-Tris は正式には Good の緩衝材ではありませんが、その構造は Norman E. Good によって開発された緩衝材と非常によく似ています。
ビストリスの名前の由来は、その構造にあります。 他の入手可能なほとんどの生物学的緩衝液とは異なり、Bi-Tris' には 2 つの異なる構造ファミリーに関連する官能基があります: ビス (2-ヒドロキシエチル) アミンファミリーと Tris ファミリーです。
利用可能な科学文献を分析して、Bis-Tris がどのように使用されてきたか、および使用前にどのような懸念があるかのリストを作成しました.
Bis-Tris バッファーの基本情報:
- CAS Number: 6976-37-0
- 分子量: 209.2g/mol
- 分子式: C8H19NO5
- 有用なph範囲: 5.8 – 7.2
- pKa (25°C): 6.46
Bis-Tris は何に推奨されますか?
- 陰イオン交換クロマトグラフィーのバッファーとして使用1
- さまざまなタイプの電気泳動でランニングバッファー、ゲルバッファー、サンプルバッファーとして使用2,3
- ゲル電気泳動 (Bi-Tris/ACES) のランニングバッファーとして ACES と共に使用4
- アガロースゲル電気泳動に使用5
研究に Bis-Tris を選択する前に、どのような懸念事項を考慮する必要がありますか?
- Pb2+ および Cu2+ と強力な錯体を形成し、他の一般的な金属との相互作用が弱い
- ビシンコニン酸 (BCA) アッセイでの使用には適していません。
- ヒト肝脂肪酸結合タンパク質 (FAB) と相互作用し、タンパク質のダイナミクスに影響を与えます6
Bi-Tris に関する役立つヒント:
- 水への溶解性が高い
- 非常に有毒な緩衝液であるカコジル酸の優れた代替品と考えられています
- UV吸収性の高いバッファーであるマレイン酸の優れた代替品と考えられています。
- 一部のタンパク質に結合し、一部の金属と錯体を形成する緩衝剤であるクエン酸の優れた代替品と考えられています。
さらに読む:The uses of Tris buffer - A starting guide
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References:
1 Donoghue, M., Hsieh, F., Baronas, E., Godbout, K., Gosselin, M., Stagliano, N., Donovan, M., Woolf, B., Robison, K., Jeyaseelan, R., Breitbart, R.E., & Acton, S. (2000). A novel angiotensin-converting enzyme–related carboxypeptidase (ACE2) converts angiotensin I to angiotensin 1-9. Circulation Research, 87(5)
2 Nijtmans, L. G., Henderson, N. S., & Holt, I. J. (2002). Blue Native electrophoresis to study mitochondrial and other protein complexes. Methods, 26(4), 327-334
3 Klampfl, C. W., Katzmayr, M. U., & Buchberger, W. (1998). Separation of inorganic and organic anions by capillary zone electrophoresis with simultaneous indirect UV and conductivity detection. Electrophoresis, 19(14), 2459-2464
4 Liu, Q., Li, X., & Sommer, S.S. (1999). pK-matched running buffers for gel electrophoresis. Anal. Biochem., 270(1), 112-122
5 Thevis, M., Loo, R. R. O., & Loo, J. A. (2003). In-gel derivatization of proteins for cysteine-specific cleavages and their analysis by mass spectrometry. J. Proteome Res., 2(2), 163-172
6 Long, D., & Yang, D. (2009). Buffer interference with protein dynamics: a case study on human liver fatty acid binding protein. Biophysical Journal, 96(4), 1482-1488